กุ้ง Nitrofuran AMOZ 0.03ppb Diagnostic ELISA Kit สำหรับนมอาหารความปลอดภัยความไว 96Wells/Kit

Nitrofuran AMOZ Diagnostic ELISA Kit for Milk Sensitivity 0.03ppb 96Wells/Kit

 

1.ชุดตรวจวินิจฉัย ELISAหลักการ

ชุดตรวจจับนี้ใช้เอนไซม์อิมมูโนแอสเซย์ที่แข่งขันได้สำหรับการตรวจจับ AMOZ ในตัวอย่างคอนจูเกตแอนติเจนถูกเคลือบไว้ล่วงหน้าบนแถบไมโครเวลล์AMOZ ในตัวอย่างแข่งขันกับคอนจูเกตแอนติเจนที่เคลือบไว้ล่วงหน้าบนแถบไมโครเวลล์สำหรับแอนติบอดีต้าน AMOZหลังจากเพิ่มคอนจูเกตของเอนไซม์แล้ว สารตั้งต้น TMB จะถูกเพิ่มสำหรับการย้อมสีค่าความหนาแน่นของแสง (OD) ของตัวอย่างมีความสัมพันธ์เชิงลบกับ AMOZ ในนั้นค่านี้จะถูกนำไปเปรียบเทียบกับกราฟมาตรฐานและจะได้ค่าความเข้มข้นของ AMOZ ในภายหลัง

 

2. ข้อกำหนดทางเทคนิค

 

ความไว: 0.03ppb

อุณหภูมิการบ่ม: 25 ℃

เวลาฟักไข่: 30 นาที～15 นาที

ขีดจำกัดการตรวจจับ เนื้อเยื่อ, ไข่, น้ำผึ้ง: 0.1ppb

อัตราการเกิดปฏิกิริยาข้าม

อโมซ 100%

เอชดี < 0.1%

AOZ < 0.1%

SEM < 0.1%

อัตราการฟื้นตัว

เนื้อเยื่อ 80 ± 25%

น้ำผึ้ง 75 ± 25%

ไข่ 95 ± 25%

 

3.Nitrofuran AMOZ ELISA ชุดทดสอบความปลอดภัยของอาหารส่วนประกอบ

 

1	แถบไมโครหลุม	12 แถบ 8 ที่ถอดออกได้ แต่ละหลุม
2	สารละลายมาตรฐาน 6× (อย่างละ 1 มล.)	0ppb	0.03ppb
		0.09ppb	0.27ppb
		0.81ppb	2.43ppb
3	เอนไซม์คอนจูเกต	7มล	หมวกสีแดง
4	วิธีแก้ปัญหาการทำงานของแอนติบอดี	7มล	หมวกสีน้ำเงิน
5	สารตั้งต้น ก	7มล	หมวกสีขาว
6	พื้นผิว B	7มล	หมวกสีดำ
7	หยุดการแก้ปัญหา	7มล	หมวกสีเหลือง
8	บัฟเฟอร์การซักเข้มข้น 20 เท่า	40มล	หมวกสีขาว
9	สารละลายที่ละลายซ้ำเข้มข้น 2 เท่า	50มล	หมวกโปร่งใส
10	2-ไนโตรเบนซาลดีไฮด์ (C7H5NO3)	2-ไนโตรเบนซาลดีไฮด์ (C7H5NO3)	2-ไนโตรเบนซาลดีไฮด์ (C7H5NO3)

 

 

4. วัสดุที่จำเป็น แต่ไม่มีให้
1) อุปกรณ์: เครื่องอ่านไมโครเพลท, เครื่องพิมพ์, เครื่องโฮโมจีไนเซอร์, เครื่องเป่าไนโตรเจน, วอร์เท็กซ์เซอร์, เครื่องปั่นเหวี่ยง, หลอดวัด, เครื่องชั่ง (0.01g ซึ่งกันและกัน), ตู้อบ, อ่างน้ำ;
2) ปิเปตขนาดเล็ก: ช่องเดียว 20-200µL, 100-1000µL, หลายช่อง 30-300µl;
3) รีเอเจนต์: NaOH, เอทิลอะซีเตต, เอ็น-เฮกเซน, HCl (ประมาณ 36.5%), K2HPO4 3H2O

5. การเตรียมตัวอย่าง

สั่ง
ต้องระบุประเด็นต่อไปนี้ก่อนการปรับสภาพตัวอย่างใดๆ:
1) การทดลองสามารถใช้ทิปแบบใช้แล้วทิ้งเท่านั้น และต้องเปลี่ยนทิปเมื่อทำการดูดสารรีเอเจนต์ต่างๆ
2) ก่อนการทดลอง อุปกรณ์การทดลองแต่ละชิ้นต้องได้รับการทำความสะอาดและทำความสะอาดซ้ำ หากจำเป็น เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนที่รบกวนผลการทดลอง

การเตรียมสารละลายก่อนการปรับสภาพตัวอย่าง:
1) 0.1 M K2HPO4: ละลาย K2HPO4 3H2O 11.4 กรัมในน้ำปราศจากไอออนถึง 500 มล.
2) 1 M HCl: ละลาย HCl 8.6 มล. (ประมาณ 36.5%) ในน้ำปราศจากไอออนถึง 100 มล.
3) 1 M NaOH: ละลาย NaOH 4 กรัมในน้ำปราศจากไอออนถึง 100 มล.
4) เจือจางสารละลาย Redissolving เข้มข้น 2x กับน้ำปราศจากไอออนที่ 1:1 (สารละลาย Redissolving เข้มข้น 1 มล. + น้ำปราศจากไอออน 1 มล.) สำหรับการละลายตัวอย่างซ้ำ

 

5.1 การเตรียมตัวอย่าง

ก)เนื้อเยื่อ, ไข่
1) ชั่งน้ำหนักตัวอย่างที่เป็นเนื้อเดียวกัน 1±0.05g เติมน้ำกลั่น 4 มล. HCl 1 โมลาร์ 0.5 มล. และ 2-ไนโตรเบนซาลดีไฮด์ (C7H5NO3) 100µL ลงในหลอดแต่ละหลอด แล้วเขย่าให้เข้ากันเป็นเวลา 2 นาที
2) บ่มข้ามคืนที่อุณหภูมิ 37°C (ประมาณ 16 ชั่วโมง) หรือในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 56°C (2 ชั่วโมง)
3) เติม K2HPO4 0.1M 5 มล., NaOH 1 M 0.4 มล. และ ethyl acetate 6 มล. ในแต่ละหลอดแล้วเขย่าเป็นเวลา 30 วินาที
4) หมุนเหวี่ยงที่อุณหภูมิห้อง (20-25°C) สูงกว่า 4,000r/นาที เป็นเวลา 10 นาที (หากมีอิมัลซิฟิเคชันหรือชั้นเอทิลอะซีเตตน้อยกว่า 3 มล. ให้บ่มตัวอย่างในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 80°C เป็นเวลา 10 นาที แล้วปั่นแยก ซ้ำๆ หรือเพิ่มความเร็วและยืดเวลาการหมุนเหวี่ยงให้นานขึ้น)
5) ย้ายชั้นเอทิลอะซีเตต 3 มล. ไปยังหลอดปั่นแยกใหม่และระเหยให้แห้งด้วยไนโตรเจนหรืออากาศที่อุณหภูมิ 50°C
6) ละลายกากแห้งใน n-hexane 2 mL เติมสารละลาย reconstituted ที่เจือจางแล้ว 1 mL ผสมให้เข้ากันเป็นเวลา 30 วินาที ปั่นแยกที่อุณหภูมิห้อง (20-25°C) ที่ความเร็วมากกว่า 4000 rpm เป็นเวลา 10 นาที;ลบเฟส n-hexane บน(หากเกิดการอิมัลซิฟิเคชัน ให้กำจัดเฟส n-hexane ด้านบน บ่มตัวอย่างในอ่างน้ำที่มีอุณหภูมิ 70°C เป็นเวลา 10-20 นาที และหมุนเหวี่ยงซ้ำๆ)
7) ใช้ 50 µL ของชั้นล่างสำหรับการวิเคราะห์
ปัจจัยการเจือจางตัวอย่าง: 2

ข) น้ำผึ้ง
1) ชั่งตัวอย่างที่เป็นเนื้อเดียวกัน (น้ำผึ้ง) 2 ± 0.05 กรัม เติมน้ำกลั่น 4 มล. 0.5 มล. 1 M HCl และ 100 µL 2-ไนโตรเบนซาลดีไฮด์ (C7H5NO3) ลงในแต่ละหลอด เขย่าให้เข้ากันเป็นเวลา 2 นาที
2) บ่มข้ามคืนที่อุณหภูมิ 37°C (ประมาณ 16 ชั่วโมง) หรือในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 56°C (2 ชั่วโมง)
3) เติม K2HPO4 0.1M 5 มล., NaOH 1 M 0.4 มล. และ ethyl acetate 6 มล. ในแต่ละหลอดแล้วเขย่าเป็นเวลา 30 วินาที
4) ปั่นแยกที่อุณหภูมิห้อง (20-25°C) สูงกว่า 4,000r/นาที เป็นเวลา 10 นาที (หากมีอิมัลซิฟิเคชันหรือชั้นเอทิลอะซิเตตน้อยกว่า 3 มล. ให้ปั่นแยกตัวอย่างซ้ำๆ ในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 80°C เป็นเวลา 10 นาที หรือ เพิ่มความเร็วและยืดเวลาการหมุนเหวี่ยงให้นานขึ้น)
5) ย้ายชั้นเอทิลอะซีเตต 3 มล. ไปยังหลอดปั่นแยกใหม่และระเหยให้แห้งด้วยไนโตรเจนหรืออากาศที่อุณหภูมิ 50°C
6) ละลายกากแห้งใน n-hexane 2 มล. เติมสารละลาย reconstituted ที่เจือจางแล้ว 1 มล. ผสมให้เข้ากันเป็นเวลา 30 วินาที ปั่นแยกที่อุณหภูมิห้อง (20-25°C) ที่ความเร็ว 4,000 รอบ/นาทีหรือมากกว่าสำหรับ 10 นาที;ลบเฟส n-hexane บน(หากเกิดการอิมัลซิฟิเคชัน ให้กำจัดเฟส n-hexane ด้านบน บ่มตัวอย่างในอ่างน้ำที่มีอุณหภูมิ 70°C เป็นเวลา 10-20 นาที และหมุนเหวี่ยงซ้ำๆ)
7) ใช้ 50 µL ของชั้นล่างสำหรับการวิเคราะห์
ปัจจัยการเจือจางตัวอย่าง: 1

 

 

6. ขั้นตอน ELISA

6.1 คำอธิบาย
1) นำรีเอเจนต์และแถบไมโครเวลล์ทั้งหมดไปที่อุณหภูมิห้อง (20-25°C) ก่อนใช้งาน
2) ใส่รีเอเจนต์ทั้งหมดกลับไปที่ 2-8°C ทันทีหลังการใช้งาน
3) ความสามารถในการทำซ้ำของชุดตรวจ ELISA ขึ้นอยู่กับความสม่ำเสมอของการล้างจานเป็นส่วนใหญ่การทำงานที่ถูกต้องของการล้างจานเป็นกุญแจสำคัญของขั้นตอน ELISA
4) ในระหว่างการบ่มที่อุณหภูมิคงที่ ตัวอย่างและรีเอเจนต์ทั้งหมดต้องได้รับการปกป้องจากแสง และควรปิดผนึกไมโครเพลทแต่ละแผ่นด้วยฟิล์มปิด

6.2 ขั้นตอนการปฏิบัติงาน
1) วางชุดอุปกรณ์ไว้ที่อุณหภูมิห้อง (20-25°C) เป็นเวลาอย่างน้อย 30 นาที โปรดทราบว่าน้ำยาแต่ละชนิดต้องเขย่าและผสมให้เข้ากันก่อนใช้งาน และใส่แถบไมโครเวลล์ที่ต้องการลงในโครงเพลตไมโครเพลทที่ไม่ได้ใช้ควรปิดผนึกและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2-8°C ไม่ใช่แช่แข็ง
2) การเตรียมสารละลาย: 40 มล. ของบัฟเฟอร์ล้างเข้มข้น 20 × เจือจาง 1:19 ด้วยน้ำปราศจากไอออน (บัฟเฟอร์ล้างเข้มข้น 20 × 1 ส่วน + น้ำปราศจากไอออน 19 ส่วน)หรือจัดเตรียมตามต้องการ.
3) การกำหนดหมายเลข: ระบุหมายเลขไมโครเวลล์ตามตัวอย่างและสารละลายมาตรฐานแต่ละตัวอย่างและสารละลายมาตรฐานควรทำซ้ำและบันทึกตำแหน่งไว้
4) เติมตัวอย่างหรือสารละลายมาตรฐาน 50µL เพื่อแยกหลุมทำซ้ำเติมเอ็นไซม์คอนจูเกต 50ul ลงในแต่ละหลุม จากนั้นเติมสารละลายการทำงานของแอนติบอดี 50µL แล้วเขย่าจานด้วยมือเพื่อผสมอย่างเบามือปิดผนึกไมโครเพลทด้วยฟิล์มคลุมและบ่มที่อุณหภูมิ 25°C เป็นเวลา 30 นาที
5) เทของเหลวในไมโครเวลออก ซับให้แห้งบนกระดาษซับ เติมบัฟเฟอร์ล้าง 250 µL/หลุม เพื่อล้างไมโครเวลเพลทเป็นเวลา 15-30 วินาที จากนั้นนำกระดาษซับออกและซับให้แห้ง ทำซ้ำ 4-5 ครั้ง(หากมีฟองอากาศหลังจากแตะ ให้ตัดออกด้วยปลายที่สะอาด)
6) การพัฒนาสี: เติม Substrate A 50 µL ลงในแต่ละหลุม ตามด้วย 50 µL ของ Substrate B ผสมอย่างเบามือด้วยการเขย่าจาน จากนั้นบ่มในที่มืดที่อุณหภูมิ 25 °C เป็นเวลา 15 นาทีเพื่อให้เกิดสี
7) การทดสอบ: เติมสารละลายหยุด 50 ไมโครลิตรลงในแต่ละหลุมผสมอย่างเบามือด้วยการเขย่าจานด้วยมือตั้งค่าความยาวคลื่นของเครื่องอ่านไมโครเพลทเป็น 450 นาโนเมตร เพื่อกำหนดค่า OD ของแต่ละหลุม(แนะนำให้อ่านค่า OD ที่ความยาวคลื่นคู่ 450/630nm ภายใน 5 นาที)

 

7. การตัดสินผลลัพธ์

 

มีสองวิธีในการตัดสินผลลัพธ์: วิธีแรกคือการตัดสินอย่างคร่าวๆ ในขณะที่วิธีที่สองคือการตัดสินเชิงปริมาณโปรดทราบว่าค่า OD ของตัวอย่างมีความสัมพันธ์เชิงลบกับความเข้มข้นของ AMOZ

7.1 การพิจารณาเชิงคุณภาพ

ช่วงความเข้มข้น (ng/mL) ของ AMOZ สามารถหาได้จากการเปรียบเทียบค่า OD เฉลี่ยของตัวอย่างกับสารละลายมาตรฐานสมมติว่าค่า OD ของตัวอย่างⅠคือ 0.3 และของตัวอย่างⅡคือ 1.0 ค่า OD ของสารละลายมาตรฐานคือ: 2.243 สำหรับ 0ppb, 1.816 สำหรับ 0.03ppb, 1.415 สำหรับ 0.09ppb, 0.74 สำหรับ 0.27ppb, 0.313 สำหรับ 0.81ppb , 0.155 สำหรับ 2.43ppb ตามช่วงความเข้มข้นของตัวอย่างⅠ คือ 0.81 ถึง 2.43ppb และของตัวอย่างⅡ คือ 0.09 ถึง 0.27ppb

7.2 การกำหนดเชิงปริมาณ

ค่าเฉลี่ยของค่าการดูดกลืนแสงนั้นได้มาจากค่า OD เฉลี่ย (B) ของตัวอย่างและสารละลายมาตรฐานหารด้วยค่า OD (B0) ของสารละลายมาตรฐานแรก (0 มาตรฐาน) แล้วคูณด้วย 100% ซึ่งก็คือ ,

เปอร์เซ็นต์ของค่าการดูดกลืนแสง =	ข	×100%
	บี0

B—ค่า OD เฉลี่ยของตัวอย่างหรือสารละลายมาตรฐาน

B0—ค่า OD เฉลี่ยของสารละลายมาตรฐาน 0 ng/mL

วาดเส้นโค้งมาตรฐานด้วยเปอร์เซ็นต์การดูดซับของสารละลายมาตรฐานและค่าเซมิโลการิทึมของสารละลายมาตรฐาน AMOZ (ng/mL) เป็นแกน Y และ X ตามลำดับอ่านความเข้มข้นที่สอดคล้องกันของตัวอย่างจากเส้นโค้งมาตรฐานโดยรวมเปอร์เซ็นต์การดูดซับเข้ากับเส้นโค้งมาตรฐานค่าผลลัพธ์จะถูกคูณด้วยค่าเจือจางที่สอดคล้องกัน จนได้ค่าความเข้มข้น AMOZ ในตัวอย่างในที่สุด

 

8. เรื่องที่ต้องให้ความสนใจ
1) อุณหภูมิห้องต่ำกว่า 25℃ หรืออุณหภูมิน้ำยาและตัวอย่างไม่กลับสู่อุณหภูมิห้อง (20-25℃) ซึ่งจะทำให้ค่า OD มาตรฐานลดลง
2) ในระหว่างกระบวนการล้าง การอบแห้งของไมโครเพลทจะมาพร้อมกับความไม่เป็นเส้นตรงของเส้นโค้งมาตรฐานและความสามารถในการทำซ้ำที่ไม่น่าพอใจดังนั้น ให้ดำเนินการขั้นตอนต่อไปทันทีหลังการซัก
3) ผสมให้เข้ากัน มิฉะนั้นจะมีความสามารถในการทำซ้ำได้ไม่ดี
4) สารละลายหยุดคือสารละลายกรดกำมะถัน 2 M หลีกเลี่ยงการสัมผัสกับผิวหนัง
5) อย่าใช้ชุดเกินวันหมดอายุการใช้รีเอเจนต์ที่เจือจางหรือเจือปนจากชุดอุปกรณ์อาจส่งผลให้ค่าความไวแสงและค่า OD ในการตรวจจับเปลี่ยนแปลงได้อย่าเปลี่ยนรีเอเจนต์จากชุดต่างๆ
6) ปิดผนึกไมโครเพลทที่ไม่ได้ใช้ในถุงแบบปิดเองสารละลายมาตรฐานและข้อต่อไม่มีสีมีความไวต่อแสงและไม่สามารถสัมผัสกับแสงได้โดยตรง
7) ทิ้งน้ำยาย้อมสีใด ๆ ที่สีบ่งบอกว่าน้ำยานั้นเสื่อมสภาพค่าการตรวจจับน้อยกว่า 0.5 สำหรับสารละลายมาตรฐาน 1 (0 ppb) บ่งชี้ถึงการเสื่อมสภาพ
8) อุณหภูมิปฏิกิริยาที่เหมาะสมคือ 25℃ และความไวในการตรวจจับและค่า OD จะเปลี่ยนไปหากอุณหภูมิสูงหรือต่ำเกินไป
 

9. ระยะเวลาการจัดเก็บและอายุการใช้งาน
การเก็บรักษา: เก็บที่อุณหภูมิ 2-8°C ห้ามแช่แข็ง
วันหมดอายุ: 12 เดือน;วันที่ผลิตอยู่บนกล่อง
หมายเหตุ: หากบรรจุภัณฑ์สูญญากาศไมโครเพลทรั่ว ยังสามารถใช้งานได้โดยไม่กระทบต่อผลการทดสอบ คุณจึงใช้งานได้อย่างมั่นใจ

 

 

Q1: เมื่อไหร่จะจัดส่ง?
A1: เราจะจัดส่งสินค้าให้คุณโดยเร็วที่สุดภายใน 7 วันทำการหลังจากได้รับการชำระเงิน(กรณีเกิดปัจจัยภายนอก เช่น โรคระบาด การจัดส่งอาจล่าช้า)

 

Q2: รองรับ OEM/ODM หรือไม่
A2: สามารถรองรับได้ แต่ปริมาณเฉพาะต้องมีมากกว่า 100,000 ชิ้น ซึ่งสะดวกสำหรับผลิตภัณฑ์ที่กำหนดเอง

 

Q3: โรงงานของคุณเป็นอย่างไรในแง่ของการควบคุมคุณภาพ?
A3: เราได้รับการรับรองมาตรฐาน ISO9001 และ ISO13485 ในระดับประเทศกระบวนการผลิตของเราเป็นไปตามขั้นตอนมาตรฐานเพื่อให้ได้ผลิตภัณฑ์ที่มีคุณภาพดีที่สุด

 

Q4: จะให้บริการหลังการขายอย่างไร?
A4: เราให้บริการหลังการขายด้านเทคนิคออนไลน์อย่างมืออาชีพเราสามารถให้คำแนะนำแบบตัวต่อตัวผ่านวิดีโอ โทรศัพท์ ฯลฯ

 

Q5: วิธีการชำระเงินคืออะไร?
A5: เราได้รับการชำระเงินโดย T / T

 

Q6: วิธีการจัดส่ง?
A6: เลือกวิธีการจัดส่งที่ดีที่สุดสำหรับคุณโดยรับใบเสนอราคาจากผู้ให้บริการที่ร่วมมือกันจำนวนมากของเรา และจัดส่งตามความต้องการของคุณด้วย