นิวคาสเซิล ไวรัสไข้หวัดนก ชุดทดสอบอย่างรวดเร็วสำหรับโรคสัตว์ปีก 192 Wells/Kit

ชุดทดสอบ ELISA ของไวรัสนิวคาสเซิลสำหรับโรคสัตว์ปีก 192 Wells/Kit

 

1. แนะนำชุดทดสอบ NDV Ab ELISA

 

ชุด ELISA แอนติบอดีไวรัสนิวคาสเซิล (NDV) ได้รับการพัฒนาเพื่อตรวจหาระดับแอนติบอดี NDV ในตัวอย่างซีรัมไก่และสามารถใช้ประเมินการวินิจฉัยทางซีรั่มของไก่ที่ติดเชื้อและการสำรวจทางระบาดวิทยาของไวรัสโรคนิวคาสเซิล การวิเคราะห์สถานะวัคซีนไวรัสโรคนิวคาสเซิลในไก่ .

 

2.ชุดทดสอบ NDV Ab ELISAหลักการ

 

ชุดนี้ใช้หลักการของการทดสอบอิมมูโนดูดซับที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ในเฟสของแข็ง (ELISA) ซึ่งประกอบด้วยปฏิกิริยาไมโครเพลทที่เคลือบด้วยแอนติเจน NDV ที่มีความบริสุทธิ์สูง IgG ต่อต้านไก่ที่ติดฉลากฮอร์สแรดิชเปอร์ออกซิเดส และรีเอเจนต์อื่นๆกลไกการเกิดปฏิกิริยาคือแอนติเจนเคลือบที่จับกับ NDV-Ab ในตัวอย่าง จากนั้นด้วยแอนติบอดี IgG ที่ต่อต้านไก่ที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์เพื่อสร้างคอมเพล็กซ์ "แอนติเจนที่เคลือบ + NDV-Ab + แอนติบอดี IgG HRP ที่ต่อต้านไก่" ให้เพิ่มสารตั้งต้น จะมีสีโดยปฏิกิริยาเร่งปฏิกิริยาของเอนไซม์ความลึกของสีเป็นสัดส่วนกับปริมาณของ NDV-Ab เมื่อตัวอย่างปฏิกิริยาโครโมเจกต์ ผลลัพธ์ที่ตรวจพบโดยเครื่องอ่านไมโครเพลทเกินค่าเกณฑ์ที่ตั้งไว้ซึ่งตัดสินว่าเป็นบวก ซึ่งบ่งชี้ว่าภูมิคุ้มกันที่สร้างภูมิคุ้มกันหรือการติดเชื้อตามธรรมชาติมีอยู่

 

3. ส่วนประกอบชุด

 

1	ไมโครเพลทเคลือบแอนติเจน NDV	96T X2
2	คอนจูเกตเอนไซม์	22 มล.	ฝาเหลือง
3	สารเจือจางตัวอย่าง	50 มล	ฝาใส
4	NDV-IgG เซรั่มควบคุมเชิงลบ	1.5 มล.	ฝาเขียว
5	NDV-IgG เซรั่มควบคุมเชิงบวก	1.5 มล.	ฝาแดง
6	พื้นผิว	12 มล. X 2	ฝาสีส้ม
7	หยุดการแก้ปัญหา	12 มล.	ฝาสีน้ำเงิน
8	20×บัฟเฟอร์ซักผ้าเข้มข้น	50 มล	ฝาขาว
9	ฟอยล์กาว	6 ชิ้น
10	คำแนะนำ	1 ชิ้น

4. วัสดุที่จำเป็นแต่ไม่ได้จัดเตรียมไว้

 

1) เครื่องอ่านไมโครเพลท (ความยาวคลื่นคู่: 450/630 นาโนเมตร)

2) Micropipettes: ช่องเดียว 1 ~ 100ml, 0.5 ~ 10ml, หลายช่อง 30 ~ 300ml

3) เครื่องซักผ้าไมโครเพลท

4) อ่างน้ำหรือตู้ฟักไข่

5) ออสซิลเลเตอร์

6) เคล็ดลับที่ใช้แล้วทิ้ง (10ul, 200ul)

7) น้ำปราศจากไอออน

 

5. ข้อกำหนดตัวอย่าง

 

1) ตัวอย่างที่ทดสอบคือ เซรั่มไก่ เก็บตัวอย่างที่ไม่มีแบคทีเรีย เก็บที่อุณหภูมิ 2 ℃~8 ℃ ไม่เกินหนึ่งสัปดาห์ เก็บที่อุณหภูมิต่ำกว่า -20 ℃ เพื่อการเก็บรักษาในระยะยาว

2) หลีกเลี่ยงการใช้ตัวอย่างภาวะเม็ดเลือดแดงแตกอย่างรุนแรง ตะกอน ที่มีไฟบรินตัวยาวและแบคทีเรียก่อมลพิษ

3) ตัวอย่างที่มีปริมาณ EDTA แบบธรรมดา, โซเดียมซิเตรตหรือสารกันเลือดแข็งโซเดียมเฮปารินไม่ส่งผลต่อการทดลอง

 

6. การเตรียมการ

 

1) นำน้ำยา ELISA ไปที่อุณหภูมิห้อง (20-25 ℃) เป็นเวลา 30 นาทีเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่ดีที่สุด

2) ตัวอย่างการเจือจาง: ใช้ตัวอย่างเจือจางเพื่อเจือจางตัวอย่างที่ 40 ครั้ง ผสมตัวอย่างที่เจือจางอย่างสม่ำเสมอจะได้ผลลัพธ์ที่ดีขึ้น

3) การเตรียมน้ำยาซักผ้า: เจือจางบัฟเฟอร์ล้างเข้มข้น 20× ด้วยน้ำปราศจากไอออน 20 ครั้ง

 

7. ขั้นตอนการทดสอบ

 

1) การเพิ่มตัวอย่าง: นำแผ่นเคลือบที่ต้องการออกตามปริมาณตัวอย่าง (สามารถถอดออกได้) และบันทึกตำแหน่งตัวอย่างบนแผ่นงานตั้งค่า 2 หลุมสำหรับเซรั่มควบคุมเชิงลบและ 2 หลุมสำหรับเซรั่มกลุ่มควบคุมเชิงบวก เพิ่มเซรั่มควบคุมเชิงลบและเชิงบวกที่ไม่เจือจางลงในบ่อน้ำตามลำดับ 100 ไมโครลิตร/หลุมอื่นๆ คือหลุมตัวอย่าง เพิ่มตัวอย่างที่เจือจางแล้ว 100 ไมโครลิตร/หลุม (การทดสอบทั้งหลุมเดียวและหลุมคู่ก็ใช้ได้)

2) การฟักไข่: คลุมด้วยฟอยล์กาวหลังจากเติมตัวอย่างแล้ว บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที

3) ลอกฟอยล์กาวออกเทของเหลวออกจากบ่อ เติมน้ำยาซักผ้าที่เจือจางลงในแต่ละบ่อจนสุด ไม่ต้องนิ่ง เทออกโดยตรงทำซ้ำ 3 ครั้ง ครั้งสุดท้าย ซับให้แห้งบนกระดาษซับน้ำ

4) เติมเอนไซม์คอนจูเกต 100 ไมโครลิตรลงในแต่ละหลุม

5) ปิดด้วยฟอยล์กาวและฟักที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที

6) ทำซ้ำขั้นตอนที่ 3

7) เติมสารตั้งต้น 100 ไมโครลิตรในแต่ละหลุม ผสมให้เข้ากัน สีเป็นเวลา 10 นาทีที่ 37℃ ในความมืด

8) เติมสารละลายสต็อป 50 ไมโครลิตรในแต่ละหลุม เขย่าอย่างสม่ำเสมอเป็นเวลา 10 วินาที และหาผลลัพธ์

9) อ่านค่า OD ของแต่ละหลุมด้วย ELISA Reader ที่ความยาวคลื่นคู่: 450/630 นาโนเมตร

 

8. ผลลัพธ์

 

โดยทั่วไป ค่า OD ของการควบคุม NDV-Positive เฉลี่ยควรเป็น ≥ 0.6 ค่า OD ของการควบคุม NDV-Negative เฉลี่ยควรน้อยกว่า 0.1 มิฉะนั้น การทดสอบจะไม่ประสบความสำเร็จ ให้ทดสอบใหม่

ผลลัพธ์จะถูกตัดสินโดยค่า S/P

S/P=(Sample OD450/630- NCx(—))/( PCx(—)- NCx(—)), NCx(—) หมายถึงค่า OD450/630 เฉลี่ยของกลุ่มควบคุมเชิงลบ PCx(—) หมายถึง OD450 เฉลี่ยของกลุ่มควบคุมที่เป็นบวก /630 ค่า

ถ้า S/P≥0.20 เป็นค่าบวกน้อยกว่า 0.20 เป็นลบ

 

9. การตีความผลลัพธ์

 

1) ภาวะเม็ดเลือดแดงแตกอย่างรุนแรง โปรตีนไฟเบอร์ในการแยกเซรั่มไม่เพียงพอ ซึ่งประกอบด้วยเม็ดเลือดแดง ตกตะกอน ตัวอย่างที่มีแบคทีเรียอาจนำไปสู่การบวกลวง

2) ผลลัพธ์ด้านลบอาจเกิดขึ้นกับไก่แต่ละตัวหลังการฉีดวัคซีน เนื่องจากความแตกต่างของแต่ละบุคคลหรือระยะเวลาของภูมิคุ้มกัน

3) ผลลัพธ์ที่เป็นบวกสำหรับการวินิจฉัยทางซีรั่มวิทยาและการตรวจทางระบาดวิทยาของไก่ นำมารวมกับวิธีการอื่นและข้อมูลทางคลินิก

 

10. ประสิทธิภาพของผลิตภัณฑ์

 

1) ความจำเพาะ: ใช้ชุดนี้เพื่อตรวจหาซีรัมอ้างอิง อัตราการปฏิบัติตามถึง 100%

2) ความไว: สามารถเข้าถึงได้สูงสุด 1:12800

3) ความแม่นยำ: CV (%) ไม่เกิน 8%

4) ความเสถียร: เก็บที่อุณหภูมิ 2 ℃ ~ 8 ℃ เป็นเวลา 12 เดือน หรือเก็บไว้ที่ 37 ℃ เป็นเวลา 3 วัน ผลลัพธ์ที่ได้จะถึง 3 มาตรฐานข้างต้น

 

11. ข้อควรระวังและคำเตือนสำหรับผู้ใช้

 

1) ชุดทดสอบนี้เหมาะสำหรับการวินิจฉัยในหลอดทดลอง

2) ห้ามใช้ชุดอุปกรณ์ที่หมดอายุ ห้ามผสมน้ำยารีเอเจนต์จากล็อตต่างๆ

3) อ่านคู่มืออย่างละเอียดก่อนใช้ชุดอุปกรณ์

4) สวมถุงมือและชุดทำงานขณะใช้งาน ให้ถือว่าชุดทดสอบมีสารติดเชื้อขยะในการทดลองควรจัดการด้วยการฆ่าเชื้อด้วยไอน้ำแรงดันสูงที่ 121 ℃ เป็นเวลา 30 นาที หรือบำบัดด้วยน้ำยาฆ่าเชื้อโซเดียมไฮโปคลอไรท์ 5.0g/L เป็นเวลา 30 นาที แล้วทิ้ง

5) แผ่น MicroWell ที่นำออกจากตู้เย็นควรมีความชื้นที่สมดุลให้แห้งที่อุณหภูมิห้องจากนั้นจึงเปิดออกใส่แผ่น MicroWell ที่ไม่ได้ใช้กลับเข้าไปในถุงฟอยล์แห้งและปิดผนึกที่อุณหภูมิ 2-8 ℃น้ำยาที่ไม่ได้ใช้ควรปิดฝา เก็บที่อุณหภูมิ 2-8 ℃ ในที่มืดร่วมกับส่วนประกอบกลุ่มอื่นๆ

6) หากบัฟเฟอร์สำหรับล้างเข้มข้น 20×ปรากฏเป็นผลึก เป็นเรื่องปกติ ใส่ที่อุณหภูมิ 37 ℃ จนกระทั่งละลาย

7) ควรใช้ Micropipettor เพื่อเพิ่มตัวอย่างและรีเอเจนต์ และมักจะพิสูจน์ความถูกต้อง

8) เมื่อเติมบัฟเฟอร์การซัก ควรเต็มแต่อย่าให้ล้น หลีกเลี่ยงการปรากฏของเอนไซม์อิสระที่ปากบ่อหรือมลพิษระหว่างบ่อ

9) สารละลายสต็อปมีฤทธิ์กัดกร่อน ใช้น้ำปริมาณมากล้างทันทีเมื่อสัมผัสผิวหนังหรือเสื้อผ้า

ข้อมูลจำเพาะ: 96 หลุม × 2

วันหมดอายุ: 12 เดือน

การเก็บรักษา: ที่อุณหภูมิ 2-8 ℃ อย่าให้โดนแสงจ้า

วันที่ผลิต: บนบรรจุภัณฑ์ด้านนอกของชุดทดสอบ

 

 

 

Q1: จะใช้เวลานานเท่าไรในการจัดส่ง?
A1: โดยปกติจัดส่งภายใน 7 วันทำการ

 

Q2: คุณสนับสนุน OEM / ODM หรือไม่?
A2: สามารถรองรับได้เราสามารถปรับแต่งตามความต้องการเฉพาะและปริมาณเฉพาะของคุณได้

 

Q3: โรงงานของคุณมีการควบคุมคุณภาพอย่างไร?
A3: เรามีการรับรอง ISO9001 และ ISO13485 จนถึงขณะนี้กระบวนการผลิตทั้งหมด เรามีกฎมาตรฐาน เราปฏิบัติตามพฤติกรรมที่เกี่ยวข้องและกฎหมายของรัฐบาล

 

Q4: รับประกันบริการหลังการขายหรือไม่?
A4: เราให้บริการหลังการขายทางเทคนิคออนไลน์อย่างมืออาชีพหากสินค้าไม่ผ่านระหว่างการทดลอง เราสามารถจัดหาให้
คำแนะนำแบบตัวต่อตัวทางโทรศัพท์ วิดีโอ และแบบฟอร์มอื่นๆ

 

Q5: ปริมาณการสั่งซื้อขั้นต่ำของคุณคืออะไร?
A5: 1Kit.

 

Q6: วิธีการจัดส่งคืออะไร?
A6: สามารถจัดส่งโดยด่วน (FEDEX, UPS, DHL, EMS, ฯลฯ ) หรือทางอากาศและทางบก โปรดยืนยันกับเราก่อนทำการสั่งซื้อ