Melamine Rapid ELISA Milk Test Kit สำหรับตรวจจับนม 96Wells/Kit ISO9001

ชุดทดสอบเมลามีน ELISA สำหรับตรวจจับน้ำนม 96Wells/Kit ISO9001

 

1. หลักการ

ชุดทดสอบนี้อ้างอิงจากอิมมูโนแอสเซย์ของเอนไซม์ที่แข่งขันทางอ้อมสำหรับการตรวจหาเมลามีนในตัวอย่างแอนติเจนของข้อต่อถูกเคลือบไว้ล่วงหน้าบนแถบหลุมขนาดเล็กเมลามีนในตัวอย่างและแอนติเจนของข้อต่อที่เคลือบไว้ล่วงหน้าบนแถบหลุมขนาดเล็กแข่งขันกันเพื่อต่อต้านแอนติบอดีเมลามีนหลังจากการเติมคอนจูเกตของเอนไซม์แล้ว สารตั้งต้น TMB จะถูกเพิ่มสำหรับการให้สีค่าความหนาแน่นของแสง (OD) ของตัวอย่างทดสอบมีความสัมพันธ์เชิงลบกับความเข้มข้นของเมลามีนในตัวอย่างค่านี้จะถูกนำไปเปรียบเทียบกับเส้นโค้งมาตรฐานและจะได้ค่าความเข้มข้นของเมลามีนในภายหลัง

 

 

2.ชุดทดสอบน้ำนมส่วนประกอบ

1	แถบไมโครหลุม	12 แถบ 8 ที่ถอดออกได้ แต่ละหลุม
2	สารละลายมาตรฐาน 6× (อย่างละ 1 มล.)	0ppb	0.5ppb
		1.5ppb	4.5ppb
		13.5ppb	40.5ppb
3	สารละลายมาตรฐานที่พุ่งพล่าน	1 แผ่นต่อนาที	1 มล
4	เอนไซม์คอนจูเกต	7มล	หมวกสีแดง
5	วิธีแก้ปัญหาการทำงานของแอนติบอดี	7มล	หมวกสีน้ำเงิน
6	สารตั้งต้น ก	7มล	หมวกสีขาว
7	พื้นผิว B	7มล	หมวกสีดำ
8	หยุดการแก้ปัญหา	7มล	หมวกสีเหลือง
9	การแยกตัวอย่าง 10x โซลูชัน A	50มล	หมวกโปร่งใส
10	ตัวอย่าง 20x แยกสารละลาย B	50มล	หมวกสีน้ำเงิน
11	บัฟเฟอร์การซักเข้มข้น 20 เท่า	15มล	หมวกสีขาว

 

3. ข้อกำหนดทางเทคนิค

ความไว: 0.5ppb

อุณหภูมิตู้อบ: 25 ℃

เวลาฟักไข่: 30 นาที～15 นาที

ขีดจำกัดการตรวจจับ:

เนย ลูกอม ชีส 10ppb

อัตราการเกิดปฏิกิริยาข้าม:

เมลามีน 100%

อัตราการฟื้นตัว:

เนย 90±25%

ลูกอม, ชีส 95±25%

 

4. วัสดุที่จำเป็น แต่ไม่มีให้

1) อุปกรณ์: เครื่องอ่านไมโครเพลท, เครื่องพิมพ์, กระแสน้ำวน, เครื่องปั่นเหวี่ยง, ปิเปตวัด, เครื่องชั่ง (ความรู้สึกซึ่งกันและกัน 0.01 กรัม), อ่างน้ำ 70 ℃;

2) ไมโครปิเปตเตอร์: ช่องเดี่ยว 20~200 µL, 100~1000 µL;และหลายช่อง 30～300 μl;

 

5. ตัวอย่างการรักษาล่วงหน้า

คำแนะนำ (ต้องจัดการกับประเด็นต่อไปนี้ก่อนการบำรุงก่อนการรักษา)

1) เฉพาะทิปที่ใช้แล้วทิ้งเท่านั้นที่สามารถใช้ได้สำหรับการทดลอง และต้องเปลี่ยนทิปเมื่อใช้กับรีเอเจนต์ที่แตกต่างกัน

2) ก่อนการทดลอง อุปกรณ์การทดลองแต่ละชิ้นต้องสะอาดและควรทำความสะอาดซ้ำหากจำเป็น เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนที่รบกวนผลการทดลอง

การเตรียมสารละลาย

1) ตัวอย่างการสกัดสารละลาย

เจือจาง 10x ตัวอย่างที่สกัดสารละลายด้วยน้ำปราศจากไอออนที่ 1:9;

2) ตัวอย่างการสกัดสารละลาย B

เจือจางสารละลาย B สำหรับการสกัดตัวอย่าง 20x ด้วยน้ำปราศจากไอออนที่ 1:19

 

5.1 เนย

1) นำเนยสด 1 กรัมใส่หลอดปั่นแยกขนาด 50 มล. เติมสารละลายตัวอย่างสกัด A 5 มล. บ่มในอ่างน้ำอุณหภูมิ 70°C เป็นเวลา 5 นาที น้ำวนและเขย่าเป็นเวลา 5 นาที ปั่นแยกที่อุณหภูมิห้องสูงกว่า 4,000 รอบ/นาที เป็นเวลา 5 นาที

2) ใช้ของเหลวชั้นล่าง 50ul เพื่อการวิเคราะห์

เท่าของการเจือจางตัวอย่าง: 5

5.2 ลูกอม, ชีส

1) นำตัวอย่างสด 1 กรัมใส่ในหลอดปั่นแยกขนาด 50 มล. เติมสารละลาย B สกัดตัวอย่าง 5 มล. บ่มในอ่างน้ำอุณหภูมิ 70°C เป็นเวลา 5 นาที น้ำวนและเขย่าเป็นเวลา 5 นาที ปั่นแยกที่อุณหภูมิสูงกว่า 4000 รอบ/นาทีที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที

2) ใช้ของเหลวชั้นล่าง 50ul เพื่อการวิเคราะห์

เท่าของการเจือจางตัวอย่าง: 5

 

6. ขั้นตอน ELISA

6.1 คำแนะนำ

1 นำรีเอเจนต์และแถบหลุมขนาดเล็กทั้งหมดไปที่อุณหภูมิห้อง (20-25 ℃)

2 คืนค่ารีเอเจนต์ทั้งหมดไปที่ 2-8 ℃ทันทีหลังจากใช้งาน

3 ความสามารถในการทำซ้ำของการวิเคราะห์ ELISA ในระดับมาก ขึ้นอยู่กับความสม่ำเสมอของการล้างจานการทำงานที่ถูกต้องของการล้างจานเป็นหัวใจสำคัญในกระบวนการของ ELISA

4 สำหรับการบ่มที่อุณหภูมิคงที่ ตัวอย่างและรีเอเจนต์ทั้งหมดต้องหลีกเลี่ยงการสัมผัสแสง และไมโครเพลทแต่ละแผ่นควรปิดผนึกด้วยเมมเบรนของฝาครอบ

6.2 ขั้นตอนการปฏิบัติงาน

1)นำชุดทดสอบไปไว้ที่อุณหภูมิห้อง (20-25 ℃) เป็นเวลาอย่างน้อย 30 นาที โปรดทราบว่าต้องเขย่ารีเอเจนต์แต่ละตัวให้เท่ากันก่อนใช้งานใส่แถบหลุมขนาดเล็กที่ต้องการลงในโครงจานปิดผนึกไมโครเพลทที่ไม่ได้ใช้อีกครั้ง เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2-8 ℃ ไม่แช่แข็ง

2)การเตรียมสารละลาย: เจือจาง 15 มล. ของบัฟเฟอร์การซักล้างเข้มข้น 20X กับน้ำปราศจากไอออนถึง 300 มล. สำหรับการใช้งาน

3)การกำหนดหมายเลข: กำหนดหมายเลขของหลุมขนาดเล็กตามตัวอย่างและสารละลายมาตรฐานแต่ละตัวอย่างและสารละลายมาตรฐานควรทำซ้ำบันทึกตำแหน่งของพวกเขา

4)เติมตัวอย่าง/สารละลายมาตรฐาน 50µL เพื่อแยกหลุมที่ซ้ำกัน จากนั้นเติมเอนไซม์คอนจูเกต 50µL จากนั้นเติมสารละลายสำหรับการทำงานของแอนติบอดี 50µL ในแต่ละหลุม เขย่าให้เข้ากัน ปิดผนึกไมโครเพลทด้วยเมมเบรนปิด และบ่มที่ 25 ℃ เป็นเวลา 30 นาที

5)เทของเหลวออกจากหลุม ล้างไมโครเพลทด้วยบัฟเฟอร์ซักล้างที่เจือจางแล้วที่ 250 ไมโครลิตร/หลุม เป็นเวลา 5-6 ครั้งแต่ละครั้งให้แช่บ่อด้วยบัฟเฟอร์การซักที่เจือจางแล้วเป็นเวลา 15-30 วินาที แล้วพลิกให้แห้งบนกระดาษซับ (หากมีฟองหลังจากกระพือ ให้ตัดด้วยปลายสะอาด)

6)การลงสี: เติม 50µL ของวัสดุพิมพ์ A จากนั้น 50 µL ของวัสดุพิมพ์ B ลงในแต่ละหลุมผสมเบา ๆ โดยการเขย่าจานด้วยตนเอง และบ่มที่ 25 ℃ เป็นเวลา 15 นาทีในที่มืดเพื่อให้สี

7)การกำหนด: เติมสารละลายหยุด 50µL ลงในแต่ละหลุมผสมเบา ๆ โดยเขย่าจานด้วยตนเองตั้งค่าความยาวคลื่นของเครื่องอ่านไมโครเพลทที่ 450 นาโนเมตร เพื่อกำหนดค่า OD ของทุกหลุม(แนะนำให้อ่านค่า OD ที่ความยาวคลื่นคู่ 450/630nm ภายใน 5 นาที)

 

7. การตัดสินผลลัพธ์

มีสองวิธีในการตัดสินผลลัพธ์อันแรกคือการตัดสินคร่าวๆ ในขณะที่อันที่สองคือการกำหนดเชิงปริมาณโปรดทราบว่าค่า OD ของตัวอย่างมีความสัมพันธ์เชิงลบกับเนื้อหาของเมลามีน

7.1 การพิจารณาเชิงคุณภาพ

ช่วงความเข้มข้น (ng/mL) สามารถหาได้จากการเปรียบเทียบค่า OD เฉลี่ยของตัวอย่างทดสอบกับสารละลายมาตรฐานสมมติว่าค่า OD ของตัวอย่างⅠคือ 0.3 และของตัวอย่างⅡคือ 1.0 ค่า OD ของสารละลายมาตรฐานคือ: 2.043 สำหรับ 0ppb, 1.604 สำหรับ 0.5ppb, 1.101 สำหรับ 1.5ppb, 0.512 สำหรับ 4.5ppb, 0.161 สำหรับ 13.5ppb , 0.055 สำหรับ 40.5ppb ตามช่วงความเข้มข้นของตัวอย่างⅠ คือ 4.5 ถึง 13.5ppb และของตัวอย่าง Ⅱ คือ 1.5 ถึง 4.5ppb

7.2 การกำหนดเชิงปริมาณ

ค่าเฉลี่ยของค่าการดูดกลืนแสงเทียบเท่ากับเปอร์เซ็นต์ของค่า OD เฉลี่ย (B) ของตัวอย่างทดสอบและสารละลายมาตรฐาน หารด้วยค่า OD (B0) ของสารละลายมาตรฐานแรก (0 มาตรฐาน) แล้วคูณด้วย 100 %, นั่นคือ

 

เปอร์เซ็นต์ของค่าการดูดกลืนแสง =	ข	×100%
	บี0

 

B—ค่า OD เฉลี่ย (หลุมคู่) ของตัวอย่างทดสอบหรือสารละลายมาตรฐาน

B0—ค่า OD เฉลี่ยของสารละลายมาตรฐาน 0ng/mL

วาดเส้นโค้งมาตรฐานด้วยเปอร์เซ็นต์การดูดซึมของสารละลายมาตรฐานและค่าเซมิโลการิทึมของสารละลายมาตรฐานเมลามีน (ng/mL) เป็นแกน Y และ X ตามลำดับอ่านความเข้มข้นที่สอดคล้องกันของตัวอย่างทดสอบจากเส้นโค้งมาตรฐานโดยรวมเปอร์เซ็นต์การดูดซับเข้ากับเส้นโค้งมาตรฐานค่าที่ได้จะถูกคูณด้วยค่าเจือจางที่สอดคล้องกัน จนได้ความเข้มข้นของเมลามีนในตัวอย่างในที่สุด

 

8. ข้อควรระวัง

1)อุณหภูมิห้องต่ำกว่า 25℃ หรืออุณหภูมิของรีเอเจนต์และตัวอย่างทดสอบที่ไม่ได้กลับสู่อุณหภูมิห้อง (20-25℃) จะทำให้ค่า OD มาตรฐานต่ำลง

2)ความแห้งของไมโครเพลทในกระบวนการล้างจะมาพร้อมกับสถานการณ์ต่างๆ รวมถึงเส้นโค้งมาตรฐานที่ไม่เป็นเชิงเส้นและความสามารถในการทำซ้ำที่ไม่พึงประสงค์ดังนั้นให้ทำขั้นตอนต่อไปทันทีหลังการซัก

3)ผสมเท่า ๆ กัน มิฉะนั้นจะมีการทำซ้ำที่ไม่พึงประสงค์

4)สารละลายหยุดคือสารละลายกรดซัลฟูริก 2 M หลีกเลี่ยงการสัมผัสกับผิวหนัง

5)อย่าใช้ชุดเกินวันหมดอายุการใช้รีเอเจนต์ที่เจือจางหรือเจือปนจากชุดอุปกรณ์จะนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงในความไวและค่า OD ที่ตรวจจับได้อย่าเปลี่ยนน้ำยาจากชุดของหมายเลขล็อตที่แตกต่างกันเพื่อใช้

6)ใส่ไมโครเพลทที่ไม่ได้ใช้ลงในถุงซีลอัตโนมัติเพื่อซีลใหม่สารมาตรฐานและสารก่อสีที่ไม่มีสีมีความไวต่อแสง ดังนั้นจึงไม่สามารถสัมผัสกับแสงได้โดยตรง

7)ทิ้งสารละลายสีด้วยสีใด ๆ ที่บ่งบอกถึงการเสื่อมสภาพของสารละลายนี้ค่าการตรวจจับของสารละลายมาตรฐาน 1(0 ppb) น้อยกว่า 0.5 บ่งชี้ถึงการเสื่อมสภาพ

8)อุณหภูมิในการทำปฏิกิริยาที่เหมาะสมคือ 25 ℃ และอุณหภูมิที่สูงหรือต่ำเกินไปจะส่งผลให้ความไวในการตรวจจับและค่า OD เปลี่ยนไป

 

9. การเก็บรักษาและวันหมดอายุ

การจัดเก็บ: เก็บไว้ที่ 2-8 ℃ ไม่แช่แข็ง

วันหมดอายุ: 12 เดือน;วันที่ผลิตอยู่บนกล่อง

หมายเหตุ: หากบรรจุภัณฑ์สูญญากาศของไมโครเพลทมีรอยรั่ว แสดงว่ายังคงใช้งานได้ ไม่ส่งผลต่อผลการทดสอบ โปรดใช้อย่างสบายใจ

 

 

Q1: คุณจะใช้เวลานานแค่ไหนในการจัดส่ง?
A1: โดยปกติจะจัดส่งภายใน 7 วันทำการ

 

Q2: คุณสนับสนุน OEM/ODM หรือไม่
A2: สามารถรองรับได้เราสามารถปรับแต่งตามความต้องการเฉพาะและปริมาณเฉพาะของคุณ

 

Q3: โรงงานของคุณเป็นอย่างไรในแง่ของการควบคุมคุณภาพ?
A3: เรามีใบรับรอง ISO9001 และ ISO13485 จนถึงขั้นตอนการผลิตทั้งหมด เรามีกฎมาตรฐาน เราปฏิบัติตามพฤติกรรมและกฎหมายที่เกี่ยวข้องของรัฐบาล

 

Q4: รับประกันบริการหลังการขายหรือไม่?
A4: เราให้บริการหลังการขายด้านเทคนิคออนไลน์อย่างมืออาชีพหากผลิตภัณฑ์ล้มเหลวในระหว่างการทดลอง เราสามารถให้ได้
คำแนะนำแบบตัวต่อตัวผ่านทางโทรศัพท์ วิดีโอ และรูปแบบอื่นๆ

 

Q5: ปริมาณการสั่งซื้อขั้นต่ำของคุณคืออะไร?
A5: 1 ชุด

 

Q6: วิธีการจัดส่งคืออะไร?
A6: สามารถจัดส่งโดยด่วน (FEDEX, UPS, DHL, EMS ฯลฯ ) หรือทางอากาศและทางบกโปรดยืนยันกับเราก่อนทำการสั่งซื้อ